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RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

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線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴(yán)格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實(shí)驗(yàn)室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準(zhǔn)度,dnaRNA純度,細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關(guān)投訴,針對極個(gè)別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價(jià)比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?

RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng),PEI轉(zhuǎn)染試劑

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請自行確定適合檢測時(shí)間。

線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復(fù)合物,并使該復(fù)合物進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細(xì)胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導(dǎo)入細(xì)胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點(diǎn):優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達(dá)水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細(xì)胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達(dá)質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細(xì)胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細(xì)胞表達(dá)eGFP。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時(shí)出現(xiàn)沉淀是什么原因?

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注意事項(xiàng)質(zhì)粒質(zhì)量:請務(wù)必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者M(jìn)N公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應(yīng)該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細(xì)胞條件:使用適當(dāng)保存和經(jīng)常傳代的健康細(xì)胞。確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌、或支原體污染。如果細(xì)胞是近期復(fù)蘇的液氮凍存細(xì)胞,請?jiān)谵D(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細(xì)胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對復(fù)合物孵化的時(shí)間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么

如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:

1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計(jì)數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個(gè)孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。

2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個(gè)需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會(huì)稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。

3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個(gè)孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時(shí),去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。

4.孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。

歡迎咨詢PEI產(chǎn)品!RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項(xiàng)

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)達(dá)爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細(xì)胞、基因診斷與zhiliao技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用除外)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、自有技術(shù)轉(zhuǎn)讓,并提供相關(guān)的技術(shù)咨詢和技術(shù)服務(wù);計(jì)算機(jī)軟件的開發(fā)、設(shè)計(jì)、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實(shí)驗(yàn)室試劑及耗材(藥品、危險(xiǎn)品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學(xué)品)、儀器儀表、機(jī)械設(shè)備、電子設(shè)備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進(jìn)出口、傭金代理(拍賣除外)?!疽婪毥?jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動(dòng)】,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù)。誠實(shí)、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準(zhǔn)則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動(dòng)孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍(lán)牙無線標(biāo)簽機(jī)。

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銅軸 等 19 人贊同該回答

銅軸承的研究和開發(fā)一直是學(xué)術(shù)界和工業(yè)界的熱點(diǎn)話題。研究人員致力于改進(jìn)材料性能、優(yōu)化制造工藝、提高設(shè)計(jì)水平等方面,以滿足不斷增長的市場需求。銅軸承的應(yīng)用不只局限于機(jī)械設(shè)備領(lǐng)域,還可以擴(kuò)展到其他領(lǐng)域,如航 。

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第1樓
直播 等 36 人贊同該回答

直播基地招商方式,線上投放:利用互聯(lián)網(wǎng)平臺進(jìn)行線上投放,包括社交媒體、短視頻平臺等,展示直播基地的品牌形象和特點(diǎn),吸引潛在投資者的關(guān)注和聯(lián)系。線下活動(dòng):通過舉辦展示會(huì)、座談會(huì)等活動(dòng),吸引更多的投資者前 。

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第2樓
廣告 等 35 人贊同該回答

廣告策劃確定受眾群體需要考慮以下因素:產(chǎn)品或服務(wù)的特點(diǎn):根據(jù)產(chǎn)品或服務(wù)的特點(diǎn),確定目標(biāo)客戶群體的特點(diǎn)和生活習(xí)慣,以便制定更有針對性的廣告策略。市場需求和競爭狀況:了解市場需求和競爭狀況,確定目標(biāo)客戶群 。

青島新能源倍速鏈輸送線
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第3樓
在流 等 31 人贊同該回答

在流水線工廠當(dāng)中必不可少的就是差速鏈流水線和倍速鏈流水線,有這樣的流水的方式讓產(chǎn)品勻速前進(jìn)。通過這樣的勻速前進(jìn),才能夠讓工人在制作產(chǎn)品的時(shí)候可以挨個(gè)逐個(gè)的來。所以這樣的一種流水線其實(shí)對于工人來說是使用 。

青島新能源倍速鏈輸送線
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第4樓
在流 等 21 人贊同該回答

在流水線工廠當(dāng)中必不可少的就是差速鏈流水線和倍速鏈流水線,有這樣的流水的方式讓產(chǎn)品勻速前進(jìn)。通過這樣的勻速前進(jìn),才能夠讓工人在制作產(chǎn)品的時(shí)候可以挨個(gè)逐個(gè)的來。所以這樣的一種流水線其實(shí)對于工人來說是使用 。

江蘇防腐PFA產(chǎn)品生產(chǎn)廠家推薦
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第5樓
防腐 等 88 人贊同該回答

防腐內(nèi)襯閥門是一種在閥門內(nèi)部涂覆防腐材料的閥門,用于防止介質(zhì)對閥門內(nèi)部金屬材料的腐蝕。隨著工業(yè)化進(jìn)程的不斷發(fā)展,防腐內(nèi)襯閥門在工業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用越來越多樣。防腐內(nèi)襯閥門的作用是在閥門內(nèi)部的流體與閥門材料之 。

上海灌封膠多少錢
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第6樓
灌封 等 81 人贊同該回答

灌封膠在潮濕環(huán)境下的性能如何?潮濕環(huán)境對于許多材料的性能都會(huì)產(chǎn)生一定的影響,灌封膠也不例外。灌封膠是一種普遍應(yīng)用于工業(yè)和建筑領(lǐng)域的密封材料,它具有優(yōu)異的密封性能和耐久性。然而,當(dāng)灌封膠暴露在潮濕環(huán)境中 。

上海灌封膠多少錢
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第7樓
灌封 等 39 人贊同該回答

灌封膠在潮濕環(huán)境下的性能如何?潮濕環(huán)境對于許多材料的性能都會(huì)產(chǎn)生一定的影響,灌封膠也不例外。灌封膠是一種普遍應(yīng)用于工業(yè)和建筑領(lǐng)域的密封材料,它具有優(yōu)異的密封性能和耐久性。然而,當(dāng)灌封膠暴露在潮濕環(huán)境中 。

佛山百年歷史保險(xiǎn)箱官網(wǎng)
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第8樓
保險(xiǎn) 等 77 人贊同該回答

保險(xiǎn)箱你的值錢物品是否容易被竊賊發(fā)現(xiàn)?外人是否可以隨意進(jìn)入你的辦公或居住場所,且即使在你外出時(shí)也是這樣?如果你不能將貴重物品安置在隱蔽的位置,沒有安全可靠的門鎖且不能確保員工具有警惕性,那么保險(xiǎn)箱的安 。

商洛家庭食育研究院靠譜嗎
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第9樓
一些 等 13 人贊同該回答

一些有條件的學(xué)校和幼兒園,還在學(xué)校的空地上種植一些簡單的蔬果,并直接把這些蔬果用于孩子們的給食,讓孩子們充分地接觸大自然,體驗(yàn)耕種艱辛和收獲的樂趣。日本**各個(gè)省廳、各級地方**還舉辦了諸多“健康飲食 。

白云區(qū)產(chǎn)后修復(fù)服務(wù)項(xiàng)目
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第10樓
在學(xué) 等 37 人贊同該回答

在學(xué)習(xí)各種瑜伽體式之前,先學(xué)會(huì)瑜伽呼吸,也就是說,瑜伽一切動(dòng)作都從呼吸運(yùn)動(dòng)開始。不會(huì)瑜伽呼吸而去練習(xí)瑜伽體式的話,就會(huì)在練習(xí)的過程中出現(xiàn)憋氣、上氣不接下氣的情況,造成頭暈、乏力等癥狀。練習(xí)時(shí)間不規(guī)律、 。

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